PRODUCT

제품소개

HiGene™ Gel & PCR Purification System

Gel Extraction과 PCR Purification을 하나로

옵션
  • BIOFACT

  • Description

    HiGene™ Gel & PCR Purification System은 PCR clean up과 gel extraction을 모두 수행할 수 있는 kit로 100 bp의 짧은 단편부터 14 kb의 긴 DNA를 높은 효율로 정제할 수 있는 장점을 갖고 있습니다.
    본 제품은 high salt buffer와 glass micro fiber membrane을 이용하여 high quality의 DNA fragments를 얻을 수 있습니다. Washing 은 ethanol을 사용하는 기존의 washing 방법과 ethanol을 사용하지 않은 새로운 washing 방법 중 선택하여 사용할 수 있습니다. 또한 pH Indicator로 인해 Help B Buffer 사용 유무를 육안으로 간편하게 확인할 수 있습니다.


    ■  Feature
    • Spin column type
    • Membrane : Glass fiber
    • Column binding capacity : 20 ㎍ DNA / column
    • Purification size : 100 bp ~ 14 kb
    • Recovery yield : above 80% (5 kb 이상은  50 ~ 70 %)
    • Sequencing grade
    • pH Indicator included
    • Visual check to help B treatment

    ■  Application
    • General sequencing             
    • Restriction enzyme digestion             
    • Cloning

  • Workflow

    - HiGene™ Gel & PCR Purification System [GP104-100]

  • QC Data

     
    - Know-how for High yield
    1.  Washing Buffer(80% EtOH) 는 fresh한 상태로 사용합니다.
    - 오래 보관된 Washing buffer는 yield를 떨어뜨리는 주요 원인이 될 수  있습니다.
    - 바로 만들어서 사용하길 권장합니다.
    2. PCR Product에 UB 첨가 후 충분히 섞어주셔야 합니다. 
    - UB가 완전히 반응할 때까지 섞어주지 않았을 경우 낮은 yield로 DNA가 정제될 수 있습니다.    
    - Buffer 첨가 후 부드럽게 4~5회  Pipetting하여 Buffer와 샘플을 충분히 섞어줍니다.
    3. Elution 전에 EtOH을 충분히 제거 후  진행합니다.
    4. PCR product 정제 목적에 따라 Dimer removal, High yield방법을 선택합니다. (Gel extraction시 High yield 방법으로 진행)
    * Gel extraction 진행 시 효율을 높이기 위해서
    - High quality agarose사용합니다.
    - UB Buffer에 gel block을 넣고 50~60℃에서 완전히 녹인 후 column에 binding합니다.
    - % 높은 agarose gel에서 정제 시 UB Buffer를 5배 이상 넣어서 완전히 녹여줍니다. 
    5. 유통기한이 지나지 않은  제품을 사용합니다.
    6. Elution 시 EB buffer를 50℃에서 10분 정도 pre-heating 시킨 후 elution하면 효율이 높아집니다. (특히, long fragment일 경우)
    7. Ethanol이 첨가되지 않는NWB 를 사용하여 washing 할 경우, column 공회전을 하지 않아 purification 시간을 단축할 수 있습니다.  
    8. UB 시약[주황색]에는 pH Indicator가 포함되어 있습니다. 유통기한이 지났거나 보관상의 문제로 pH가 변하여
       [보라색]으로 색상이 변한 시약을 사용하시면 정제 수율이 감소할 수 있으니 색상을 반드시 확인하신 후 실험을 진행해 주세요.
    9. Help B 시약을 Column에 처리한 후, UB 혼합액(PCR product + UB)을 Binding하면 Column에서 내려간 혼합액이
       [보라색]으로 변화합니다.  Column의 Help B 처리 유무를 육안으로 간편하게 확인하세요.   

     

  • Document

  • Etc.

    Reference
    1.  WIN, Theint Theint, et al. Monitoring the microbial community shift throughout the shock changes of hydraulic retention time in an anaerobic moving bed membrane bioreactor. Bioresource technology, 2016, 202: 125-132
    2.  LEE, Seung-Yeol, et al. Survey of Cherry necrotic rusty mottle virus and Cherry green ring mottle virus incidence in Korea by Duplex RT-PCR. The plant pathology journal, 2014, 30.4: 445.
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