PRODUCT

제품소개

HiGene™ Plasmid Mini Prep Kit (Ver.2.0)

2 Step으로 간편해진 Plasmid 추출

옵션
  • Ver. 1.0
  • Ver. 2.0

  • Description

    HiGene™ Plasmid Mini Prep Kit (Ver.2.0)는 기존의 Plasmid prep kit를 업그레이드 시킨 제품으로 alkaline lysis method 방식을 응용하여 기존의 3 step system을 2 step system으로 줄여 실험 과정이 간편하고 clear lysate 시간을 단축시켜 실험시간이 짧아진 제품입니다. 뿐만 아니라 spin column을 이용하여 고순도로 추출한 plasmid는 일반적인 PCR, cloning, general sequencing, in vitro transcription 등의 분자생물학 실험에 활용됩니다. 또한 본 제품은 low copy plasmid와 large size의 원형 DNA 즉 Fosmid, BAC clone 의 prep도 가능합니다. pH 변화 관찰이 가능한 blue indicator를 함께 제공하여 plasmid DNA 분리 과정 시 발생하는 pH의 변화를 color change 방식으로 확인할 수 있습니다. Washing은 ethanol을 사용하는 기존의 washing 방법과 ethanol을 사용하지 않은 새로운 washing 방법 중 선택하여 사용할 수 있습니다. 

    ■ Feature
    • Spin column type
    • Membrane : Glass fiber
    • Column binding capacity : 20 ㎍ DNA / column
    • Sequencing grade
    • Low copy plasmid prep
    • Large size circular DNA (Fosmid, BAC clone) prep    		  

  • Workflow

    - HiGene™ Plasmid Mini Prep Kit [PM105-100]

  • QC Data

     

    For high yield
    1. Cell culture time → 최소 12 ~ 16 hr
    2. Culture volume → 3 ㎖ ~ 5 ㎖
    3. Washing Buffer(80% EtOH) 는 fresh한 상태로 사용  합니다. → 오래 보관된 Washing buffer는 yield를 떨어뜨리는 주요 원인이 될 수 있습니다.
        → 바로 만들어서 사용하길 권장합니다.
    4. B2 Buffer에 RNase A(20 ㎎ / ㎖) 첨가 후 냉장 보관합니다. 
    5. Elution Buffer 사용 전에 EtOH을 충분히 제거 후  진행합니다. (공회전)
    6. 유통기한이 지나지 않은  제품을 사용합니다.
    7. Lysis 시킬 때 강하게 vortex를 할 경우 DNA가 degradation될 수 있으므로 조심합니다. 
    8. DNA elution 시 EB buffer를 50℃에서 10분 정도 pre-heating 시킨 후 elution하면 효율이 높아집니다. (특히, long fragments일 경우)
    9. 상층액과 debris 분리가 어려운 경우 4℃ 또는 Ice에 incubation 하였다가 진행합니다. 
    10. Ethanol이 첨가되지 않는 NWB 를 사용하여 washing 할 경우, column 공회전을 하지 않아 mini prep 시간을 단축할 수 있습니다.  

    pH 변화를 관찰 할 수 있는 Blue Indicator

  • Document

  • Etc.

    Reference
    1. CHOI, Yeon Hee, et al. A LuxR-type Transcriptional Regulator, PsyR, Coordinates Regulation of Pathogenesis-related Genes in Pseudomonas syringae pv. tabaci. Journal of Life Science, 2015, 25.2: 136-150.
    2. KIM, Dooil, et al. Escherichia coli ASKA Clone Library Harboring tRNA-Specific Adenosine Deaminase (tadA) Reveals Resistance towards Xanthorrhizol. Molecules, 2015, 20.9: 16290-16305.
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