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[Electrophoresis] 핵산 전기영동에 사용되는 TAE buffer & TBE buffer의 특징

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작성일 2023-01-19 13:37:03 조회수 661
안녕하세요.

바이오팩트 학술팀입니다.

전기영동을 하기 위해선, 전기가 통할 수 있는 환경을 만들어주어야 하는데,
이때 사용하는 완충용액으로, TAE 또는 TBE buffer를 사용합니다.

실험 목적에 따라 나눠서 사용 한다면 아래와 같은 특성을 참고해주세요. 

TAE (Tris-Acetate-EDTA) buffer
- DNA의 분자량이 큰 경우 사용  (>12Kb) [plasmid DNA를 사용하는 경우]
- gel elution시 사용 (DNA 회수 실험에 적합)
- 낮은 이온 강도와 buffer capacity
  : 장기간 전기영동 시 필요에 따라 buffer 교체 필요

   직접 만들 경우, TBE에 비해 저렴한 비용으로 인해 가장 널리 사용되고 있습니다.

TBE (Tris-Boric acid-EDTA) buffer
- DNA 분자량 작은 경우 사용 (<1Kb) - PCR을 주로 하는 경우
- acrylamide gel 전기영동시 사용
- 높은 이온 강도와 buffer capacity
  : 장기간 전기영동 시 적합

* Buffer capacity : TAE < TBE
TAE buffer는 반복해서 사용할 경우 DNA band가 smear 해질 가능성이 있으며,
TBE는 더 오래 사용할 수 있고 전기영동을 길게 할 경우 적합합니다.

DNA의 전하는 전기영동 시 이용되는 완충용액의 pH에 따라 영향을 받으므로, 적절한 농도의 TAE 및 TBE buffer 사용이 중요합니다.
0.5X ~ 1X로 희석하여 사용하며, 완충용액의 농도가 높으면 전하량이 커져 이동속도가 빨라지지만, 열이 발생하므로 주의해야합니다.

감사합니다.

#전기영동 #buffer #TAE buffer #TBE buffer #완충용액 #gel-elution #electrophoresis 

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